فومارات دی متیل که با نام‌های (E)-2-بوتندی‌اوئیک اسید دی متیل استر، ترانس-بوتندی‌اوئیک اسید دی متیل استر نیز شناخته می‌شود، به طور متناوب به عنوان مالئات دی متیل نیز نامیده می‌شود، که معمولاً به عنوان نگهدارنده ضد کپک Moldkiller شماره 1 شناخته می‌شود و به اختصار DMF نامیده می‌شود. در دمای اتاق به صورت کریستال‌های سفید یا پودر کریستالی ظاهر می‌شود. در اتیل استات، کلروفرم، استون و الکل‌ها محلول است، کمی در اتر محلول است و بسیار کم در آب محلول است. DMF به دلیل اثرات خورنده و آلرژی‌زای آن بر بدن انسان سمی است. آزمایشات بالینی نشان داده است که مصرف DMF می‌تواند باعث آسیب‌های خورنده و واکنش‌های آلرژیک در روده و اندام‌های داخلی شود. علاوه بر این، هنگامی که این ماده با پوست تماس پیدا می‌کند، می‌تواند باعث درماتیت تماسی دردناک شود، از جمله علائمی مانند خارش، تحریک، قرمزی و سوختگی. این ماده تهدیدی جدی برای سلامت انسان است و به ویژه برای رشد و تکامل کودکان مضر است. فومارات دی متیل زمانی به طور گسترده برای جلوگیری از کپک، پوسیدگی و حشرات و همچنین حفظ تازگی در مواد غذایی، نوشیدنی‌ها، خوراک دام، گیاهان دارویی سنتی چینی، لوازم آرایشی، ماهی، گوشت، سبزیجات، میوه‌ها و غیره استفاده می‌شد. اکنون به عنوان یک ماده غیر خوراکی طبقه‌بندی شده و استفاده از آن در محصولات غذایی (از جمله محصولات مبتنی بر آرد) ممنوع است.
استاندارد مرجع: NY/T 1723-2009 تعیین فومارات دی متیل در مواد غذایی - کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا.
1. مواد آزمایش
1.1 متانول: گرید HPLC
1.2 نمونه نوشیدنی
1.3 آب فوق خالص
1.4 استاندارد فومارات دی متیل
1.5 فیلتر: اندازه منافذ 0.22 میکرومتر
1.6 تمیزکننده اولتراسونیک
1.7 ویال نمونه کهربایی 2 میلی‌لیتری
1.8 سرنگ یکبار مصرف 2 میلی‌لیتری
1.9 Nova Pre - HLB 150mg/6mL
2. پیش‌تیمار آزمایش
نقاط غلظت منحنی کالیبراسیون را در 5 میلی‌گرم در لیتر، 10 میلی‌گرم در لیتر، 15 میلی‌گرم در لیتر، 20 میلی‌گرم در لیتر، 25 میلی‌گرم در لیتر و 50 میلی‌گرم در لیتر تهیه کنید.
تمیز کردن با استفاده از ستون SPE NovaPre HLB (150mg/6mL):
1 فعال‌سازی: قبل از استفاده، کارتریج HLB را با 6 میلی‌لیتر متانول و سپس 6 میلی‌لیتر آب آماده کنید.
2. بارگیری: یک آلیوت 5 میلی‌لیتری از نمونه نوشیدنی از طریق کارتریج عبور داده شد و پساب دور ریخته شد.
3. شستشو: کارتریج را با 5 میلی‌لیتر محلول 5٪ متانول در آب شستشو دهید. پساب را دور بریزید و کارتریج را تحت خلاء خشک کنید.
4. شستشو: کارتریج با 5 میلی‌لیتر محلول 80٪ متانول در آب شستشو داده شد و الوت جمع‌آوری شد. (در طول کل فرآیند بارگیری و شستشو، سرعت جریان در 1 میلی‌لیتر در دقیقه یا کمتر حفظ شد).
5. آنالیز دستگاهی: الوت از طریق یک غشای 0.22 میکرومتر فیلتر شد و سپس برای آنالیز دستگاهی ارسال شد.
3. شرایط آزمایش
| ستون کروماتوگرافی |
Nova Atom PC18 4.6*250mm 5μm |
| دستگاه |
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا LC3200 |
| سرعت جریان |
1.0 میلی‌لیتر در دقیقه |
| دمای ستون |
30 درجه سانتی‌گراد |
| فاز متحرک |
A: متانول، B: آب = 45:55 |
| آشکارساز |
UV |
| طول موج |
220 نانومتر |
| حجم تزریق |
20 میکرولیتر |
4. نتیجه آزمایش
4.1 آزمایش استاندارد
| شماره |
ترکیب |
زمان بازداری (دقیقه) |
تعداد صفحه نظری |
فاکتور دم |
ارتفاع پیک (mAU) |
مساحت پیک (mAU*s) |
درصد مساحت پیک |
درصد ارتفاع پیک |
| 1 |
فومارات دی متیل |
10.675 |
16463 |
1.148 |
54.785 |
703.324 |
100.000 |
100.000
|
4.2 کروماتوگرام نمونه اسپایک شده
نتایج بازیابی اسپایک شده
| شماره |
ترکیب |
زمان بازداری (دقیقه) |
تعداد صفحه نظری |
فاکتور دم |
ارتفاع پیک (mAU) |
مساحت پیک (mAU*s) |
درصد مساحت پیک |
درصد ارتفاع پیک |
| 1 |
فومارات دی متیل |
10.691 |
16811 |
1.165 |
64.537 |
823.910 |
100.000 |
100.000 |
| نام تجاری/ بازیابی اسپایک شده |
A1/N1/W1 |
A1/N1/W1 |
A2/N2/W2 |
A2/N2/W2 |
A3/N3/W3 |
A3/N3/W3 |
میانگین درصد بازیابی |
| NovaChrom |
102.3% |
98.72% |
99.97% |
99.76% |
94.57% |
98.58% |
98.98% |
| یک برند داخلی پیشرو |
93.56% |
92.3% |
93.65% |
93.95% |
96.3% |
96% |
94.29% |
| یک برند وارداتی |
92.52% |
90.82% |
92.28% |
90.94% |
91.78% |
92.39% |
91.45% |
5. نتیجه‌گیری
آنالیز فومارات دی متیل در نوشیدنی‌ها با استفاده از کروماتوگراف مایع سری Wayeal LC3200 با ستون NovaChrom Nova Atom PC18 (4.6 × 250mm، 5μm) همراه با یک روش آماده‌سازی نمونه ساده با استفاده از ستون استخراج فاز جامد NovaChrom NovaPre-HLB (150mg/6mL) انجام شد. این روش میانگین بازیابی 98.98٪ را در سطح اسپایک 5 میلی‌گرم در کیلوگرم با شکل پیک عالی نشان داد.
پیام شما باید بین 20 تا 3000 کاراکتر باشد!
