|
شماره
|
معرف‌ها و استانداردها
|
خلوص
|
|
1
|
استونیتریل
|
درجه HPLC
|
|
2
|
تری‌فلوئورواستیک اسید
|
AR
|
|
3
|
سدیم دودسیل سولفات
|
AR
|
|
4
|
N-Nitroso-Desloratadine
|
98.9%
|
1.3 مواد آزمایشگاهی و تجهیزات کمکی
تمیزکننده اولتراسونیک
میکسر ورتکس
2. روش آزمایش
2.1 تهیه محلول
2.1.1 محلول آبی سدیم دودسیل سولفات (SDS):0.865 گرم سدیم دودسیل سولفات را وزن کرده و 0.5 میلی‌لیتر تری‌فلوئورواستیک اسید اضافه کنید. با آب به حجم 1000 میلی‌لیتر برسانید و کاملاً مخلوط کنید تا کاملاً حل شود.
2.1.2 حلال: مشابه فاز متحرک (دقیقاً 570 میلی‌لیتر محلول آبی سدیم دودسیل سولفات و 430 میلی‌لیتر استونیتریل را اندازه‌گیری کنید، خوب مخلوط کنید و آماده استفاده کنید).
2.1.3 محلول خطی:مقدار مناسبی از استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine را دقیقاً وزن کنید و با فاز متحرک حل و رقیق کنید تا محلولی حاوی تقریباً 0.8μg/mL به عنوان محلول استاندارد انبار به دست آید. سپس، 1.0 میلی‌لیتر، 1.5 میلی‌لیتر، 2.0 میلی‌لیتر، 4.0 میلی‌لیتر و 10.0 میلی‌لیتر از محلول استاندارد انبار را دقیقاً به پنج فلاسک حجمی 100 میلی‌لیتری جداگانه پیپت کنید. با فاز متحرک به حجم برسانید و خوب مخلوط کنید تا منحنی‌های کاری سری استاندارد با غلظت‌های 8 نانوگرم در میلی‌لیتر، 12 نانوگرم در میلی‌لیتر، 16 نانوگرم در میلی‌لیتر، 32 نانوگرم در میلی‌لیتر و 80 نانوگرم در میلی‌لیتر تهیه شود.
2.1.4 محلول استاندارد مرجع:مقدار مناسبی از استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine را دقیقاً وزن کنید، با فاز متحرک حل و رقیق کنید تا محلولی حاوی تقریباً 16 نانوگرم در میلی‌لیتر N-Nitroso-Desloratadine به عنوان محلول استاندارد مرجع تهیه شود.
2.2 تهیه نمونه
2.2.1 محلول نمونه
مقدار مناسبی از API دسلوراتادین را دقیقاً پیپت کنید، با فاز متحرک حل و رقیق کنید تا محلولی حاوی تقریباً 0.2 میلی‌گرم در میلی‌لیتر دسلوراتادین به عنوان محلول نمونه تهیه شود.
2.2.2 محلول دقت
تقریباً 20 میلی‌گرم API دسلوراتادین را در یک فلاسک حجمی 100 میلی‌لیتری وزن کنید. مقدار مناسبی از محلول استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine را اضافه کنید، حل کنید و با فاز متحرک به حجم برسانید تا یک نمونه 100٪ اسپایک شده تهیه شود. خوب مخلوط کنید تا محلول دقت به دست آید.
3. نتیجه آزمایش
3.1 ویژگی
شکل 2 کروماتوگرام تست ویژگی
توجه: حلال با تشخیص N-Nitroso-Desloratadine تداخلی ندارد و قله‌های ناخالصی دیگر در محلول آزمایش نیز با تعیین ناخالصی N-Nitroso-Desloratadine تداخلی ندارند.
3.2 تست خطی
شکل 3 کروماتوگرام همپوشانی برای تست ناخالصی N-Nitroso-Desloratadine
شکل 4 منحنی استاندارد برای ناخالصی‌های N-Nitroso-Desloratadine
توجه: نتایج آزمایش نشان می‌دهد که ضریب همبستگی خطی (R) برای تست ناخالصی N-Nitroso-Desloratadine بیش از 0.999 است که الزامات آزمایش را برآورده می‌کند.
3.3 تست تکرارپذیری
شکل 5 کروماتوگرام‌های تکرارپذیری استاندارد 16 نانوگرم در میلی‌لیتر (6 تزریق)
جدول 3 داده‌های تست تکرارپذیری برای استاندارد 16 نانوگرم در میلی‌لیتر (6 تزریق)
|
ترکیب
|
زمان بازداری (دقیقه)
|
|
N-Nitroso-Desloratadine
|
15.426
|
|
15.432
|
|
15.414
|
|
15.416
|
|
15.432
|
|
15.417
|
|
متوسط
|
15.421
|
|
RSD (%)
|
0.045
|
توجه: بر اساس داده‌های جدول بالا، تکرارپذیری زمان بازداری برای N-Nitroso-Desloratadine 0.045٪ و تکرارپذیری مساحت قله 2.043٪ است که نشان‌دهنده تکرارپذیری خوب است.
3.4 تست دقت
شکل 6 کروماتوگرام همپوشانی دقت برای API دسلوراتادین
جدول 4 دقت API دسلوراتادین (N-Nitroso-Desloratadine)
|
سطح
|
مقدار شناخته شده (نانوگرم)
|
اسپایک شده (نانوگرم)
|
مقدار اندازه‌گیری شده (نانوگرم)
|
بازیابی (%)
|
متوسط (%)
|
|
100%
|
0.00
|
1611.52
|
1656.365
|
99.690
|
100.11
|
|
100%
|
0.00
|
1610.546
|
96.932
|
|
100%
|
0.00
|
1686.721
|
101.517
|
|
100%
|
0.00
|
1704.476
|
102.585
|
|
100%
|
0.00
|
1615.701
|
97.242
|
|
100%
|
0.00
|
1706.194
|
102.689
|
توجه: میزان بازیابی N-nitroso-desloratadine در شش نمونه از 97.24٪ تا 102.69٪ متغیر بود که RSD آن 2.58٪ بود. این نتایج نشان می‌دهد که این روش دقت و تکرارپذیری عالی را برای تشخیص این ناخالصی به دست می‌آورد.
3.5 تست حد تشخیص (LOD)
شکل 7 کروماتوگرام استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine در 8 نانوگرم در میلی‌لیتر
جدول 5 داده‌های تست برای استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine در 8 نانوگرم در میلی‌لیتر
|
ترکیب
|
زمان بازداری (دقیقه)
|
مساحت قله (mAU*s)
|
SNR
|
|
N-Nitroso-Desloratadine
|
15.434
|
1.213
|
30.042
|
توجه: بر اساس داده‌های تست برای استاندارد مرجع N-Nitroso-Desloratadine در 8 نانوگرم در میلی‌لیتر در جدول بالا، حد تشخیص نظری (LOD) محاسبه شده با استفاده از نسبت سیگنال به نویز 3 برابر، 0.7989 نانوگرم در میلی‌لیتر است.
3.6 آزمایش مواد اولیه برای یک تولیدکننده خاص
شکل 8 کروماتوگرام آزمایش API برای یک تولیدکننده خاص
توجه: هیچ N-Nitroso-Desloratadine در API تشخیص داده نشد.
4. نتیجه‌گیری
یک مطالعه در مورد ناخالصی نیتروزامین N-Nitroso-Desloratadine در ماده دارویی فعال (API) دسلوراتادین بر اساس سند راهنمای FDA که اخیراً صادر شده است، در مورد ایجاد محدودیت‌های مصرف قابل قبول برای ناخالصی‌های مرتبط با ماده دارویی نیتروزامین (NDSRIs) انجام شد. طبق این سند، مقدار مصرف قابل قبول (AI) روی 400 نانوگرم در روز تنظیم شده است. همراه با حداکثر دوز روزانه محصول (5 میلی‌گرم)، حد کنترل در API نباید از 80ppm تجاوز کند. اعتبارسنجی روش‌شناختی با استفاده از سیستم کروماتوگرافی مایع با کارایی بالای (HPLC) سری LC3400 Wayeal، مجهز به آشکارساز فرابنفش (UV) انجام شد. روش تحلیلی معتبر برای آزمایش نمونه‌های ماده دارویی فعال اعمال شد و هیچ ناخالصی نیتروزامین (N-nitroso-desloratadine) تشخیص داده نشد. تمام داده‌های فوق الزامات روش فارماکوپه برای ابزارها را برآورده می‌کنند.
پیام شما باید بین 20 تا 3000 کاراکتر باشد!
