تعیین بقایای گلیفوسات و چهار آفت‌کش و متابولیت‌های آن‌ها در سیب با سیستم کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی دوگانه Wayeal LCMS-TQ9200

گلیفوسات، گلوفوسینات، اتفون و چهار آفت‌کش دیگر به همراه متابولیت‌هایشان، به دلیل کارایی بالا و اثرات علف‌کش و رسیده‌کننده طیف گسترده، به طور گسترده در کشت محصولات زراعی استفاده می‌شوند و آنها را به ورودی‌های مهم کشاورزی برای تضمین عملکرد محصول و بهبود بهره‌وری کشاورزی تبدیل می‌کنند.

چین محدودیت‌های حداکثر باقی‌مانده (MRLs) را برای گلیفوسات و سایر آفت‌کش‌ها در غذاهای مشتق شده از گیاهان تعیین کرده است. بنابراین، توسعه یک روش تشخیص حساس، دقیق و کارآمد از اهمیت عملی زیادی برای تضمین کیفیت و ایمنی محصولات کشاورزی، تنظیم شیوه‌های تولید کشاورزی و حفاظت از سلامت مصرف‌کنندگان برخوردار است.

در حال حاضر، روش‌های تشخیص گلیفوسات و سه آفت‌کش دیگر به همراه متابولیت‌هایشان در غذاهای مشتق شده از گیاهان عمدتاً شامل کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)، کروماتوگرافی گازی (GC) و کروماتوگرافی یونی (IC) است.

در میان این روش‌ها، HPLC مستعد جذب ماتریس است؛ GC نیاز به مشتق‌سازی آنالیت‌های قطبی مانند گلیفوسات دارد؛ و IC از مسائلی مانند کارایی جداسازی پایین و قابلیت ضد تداخل ضعیف رنج می‌برد. این محدودیت‌ها کاربرد گسترده آنها را در تشخیص باقی‌مانده در انواع مختلف غذاهای مشتق شده از گیاهان، از جمله غلات، سبزیجات و چای محدود می‌کند.

GB 23200.122-2026 یک روش تشخیص برای باقی‌مانده گلیفوسات، سه آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها را بر اساس LC-MS/MS ایجاد می‌کند. با بهینه‌سازی شرایط پیش‌تصفیه نمونه، پارامترهای جداسازی کروماتوگرافی و حالت‌های تشخیص طیف‌سنجی جرمی، این روش با هدف رفع مشکلات رایج در روش‌های سنتی، مانند تداخل بالا، حساسیت پایین، عملیات پیچیده و سازگاری ضعیف با ماتریس، انجام می‌شود. این روش امکان تعیین سریع و دقیق باقی‌مانده گلیفوسات و چهار آفت‌کش و متابولیت‌های آنها را در غذاهای مشتق شده از گیاهان فراهم می‌کند و در نتیجه پشتیبانی فنی قابل اعتماد و مراجع استاندارد را برای کنترل کیفیت در شرکت‌های تولید کشاورزی، آزمایش‌های معمول در موسسات بازرسی و آزمایش، و بازرسی نظارتی توسط مقامات نظارتی ارائه می‌دهد.

کلیدواژه‌ها: سیستم LC-MS/MS سه‌گانه چهارگانه، سیب، گلیفوسات.

1. ابزار و معرف‌ها

1.1 لیست پیکربندی LCMS/MS

جدول 1 لیست پیکربندی ابزار

1.2 معرف‌ها و استانداردها

جدول 2 لیست معرف‌ها و استانداردها

1.3 مواد آزمایشی و تجهیزات کمکی

میکسر ورتکس

ترازوی صدهزارم

سانتریفیوژ

کارتریج استخراج فاز جامد NovaChrom NovaPre HLB، 200 میلی‌گرم/6 میلی‌لیتر

2. روش آزمایش

2.1 آماده‌سازی محلول

2.1.1 محلول‌های کاری استاندارد گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها: محلول استاندارد گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها را با دقت به 1 میلی‌گرم بر لیتر رقیق کنید، سپس با ماتریس سیب خالی رقیق کنید تا مجموعه‌ای از غلظت‌های منحنی کاری 5 میکروگرم بر لیتر، 10 میکروگرم بر لیتر، 20 میکروگرم بر لیتر، 50 میکروگرم بر لیتر، 100 میکروگرم بر لیتر، 200 میکروگرم بر لیتر و 50 میکروگرم بر لیتر تهیه شود.

2.2 شرایط آزمایش

2.2.1 شرایط HPLC

ستون: ستون تخصصی باقی‌مانده آفت‌کش NovaChrom NovaIC A4-P، 4*150 میلی‌متر، 5 میکرومتر

فاز متحرک: فاز A: آب؛ فاز B: محلول 200 میلی‌مولار کربنات آمونیوم - 0.05% آمونیاک

نرخ جریان: 0.6 میلی‌لیتر بر دقیقه

دمای ستون: 40 درجه سانتی‌گراد

حجم تزریق: 10 میکرولیتر

2.2.2 شرایط طیف‌سنجی جرمی

جدول 3 پارامترهای منبع یون طیف‌سنجی جرمی

3. نتیجه آزمایش

3.1 کروماتوگرام استاندارد

تعیین گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در ماتریس سیب در عرض 15 دقیقه تکمیل شد، با شکل پیک خوب، بدون دم پیک، و پاسخ‌های رضایت‌بخش ترکیب، که الزامات تجزیه و تحلیل آزمایشی را برآورده می‌کند.

شکل 1 کروماتوگرام گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در ماتریس سیب (200 میکروگرم بر لیتر)

3.2 محدوده خطی

محلول استاندارد مخلوط گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها با ماتریس سیب خالی به صورت سری رقیق شد تا مجموعه‌ای از غلظت‌ها برای ساخت منحنی استاندارد تهیه شود. محدوده خطی برای اکثر ترکیبات 5-500 میکروگرم بر لیتر بود. انحراف بین نتایج کالیبراسیون خطی و غلظت‌های شناخته شده در حد حداکثر انحراف مجاز بود. ضرایب همبستگی خطی برای تمام ترکیبات بیشتر از 0.995 بود که نشان‌دهنده خطی بودن خوب است.

شکل 2 منحنی‌های کالیبراسیون گلیفوسات، چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در ماتریس سیب

3.3 حد تعیین (LOQ)

نسبت سیگنال به نویز برای تمام ترکیبات در این روش در LOQ 5 میکروگرم بر لیتر از 10 بیشتر است و با معیارهای حساسیت استاندارد مطابقت دارد.

جدول 4 پارامترهای طیف‌سنجی جرمی برای ترکیبات

3.4 تست دقت

یک محلول سیب ماتریس اسپایک شده از گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در غلظت 10 میکروگرم بر لیتر شش بار متوالی تزریق شد تا دقت ارزیابی شود. نتایج در جدول زیر نشان داده شده است و الزامات دقت ≤10% را برآورده می‌کند.

جدول 5 دقت ترکیبات

شکل 3 کروماتوگرام‌های گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در ماتریس سیب (10 میکروگرم بر لیتر)

3.5 تست نمونه سیب

نمونه‌های سیب تجاری طبق روش استاندارد پیش‌تصفیه و تجزیه و تحلیل شدند. همانطور که در شکل زیر نشان داده شده است، هیچ ترکیبی هدف شناسایی نشد.

شکل 4 کروماتوگرام‌های گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در نمونه‌های سیب

4. نتیجه‌گیری

در این روش، سیستم کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی دوگانه Wayeal LCMS-TQ9200 برای تعیین باقی‌مانده گلیفوسات و چهار آفت‌کش دیگر و متابولیت‌های آنها در سیب استفاده شد. داده‌های آزمایش نشان می‌دهد که این روش شکل پیک کروماتوگرافی خوبی بدون دم، حساسیت مطابق با الزامات، ضرایب همبستگی خطی بیشتر از 0.995 برای تمام ترکیبات، و دقت کمتر از 10% را ارائه می‌دهد. هیچ انتقال سیستمی برای نمونه‌های با غلظت بالا مشاهده نشد. این نتایج نشان می‌دهد که این روش، هنگامی که با سیستم کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی دوگانه Wanyi Technology مجهز شده است، الزامات تشخیص کیفی و کمی معمول برای آنالیت‌های هدف را برآورده می‌کند.