تعیین ناخالصی های نیتروزامین در قرص های پروپرانولول هیدروکلوراید با کروماتوگرافی مایع

کلمات کلیدی: پروپرانولول، کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا، ناخالصی های نیتروزامین

1ابزارها و عوامل

1.1 لیست پیکربندی سیستم HPLC

1.2 واکنش ها و راه حل های استاندارد

جدول 2 واکنش ها و راه حل های استاندارد

1.3 مواد آزمایشی و تجهیزات کمکی

پاک کننده فوق صوتی

مخلوط کننده گرداب

2روش تجربی

2.1 آماده سازی محلول

2.1.1 2mol/L محلول هیدروکسید سدیم: 4g هیدروکسید سدیم را بگیرید، در 50mL آب حل کنید و به خوبی مخلوط کنید.

2.1.2 اسیتونیتریل-آب-اسید گوگرد (55:45:0.1) مخلوط: 1.6 گرم سولفات سدیم دودسیل و 0.31 گرم tetrabutylammonium dihydrogen phosphate را بردارید، 1 میلی لیتر اسید سولفوریک، 450 میلی لیتر آب و 550 میلی لیتر استونیتریل را اضافه کنید. pH را به 3 تنظیم کنید.3 با محلول هیدروکسید سدیم 2 مول/لیتر، و خوب مخلوط کنید.

2.1.3 حلال: مشابه فاز متحرک است.

2.1.4 راه حل خطی: مقدار مناسب N-Nitroso-propranolol را با دقت وزن کنید.محلول شده و با فاز متحرک رقیق شود تا محلول حاوی حدود 200ng در هر 1mL به عنوان محلول استاندارد دریافت شود.سپس با دقت حجم مناسب محلول اصلی را به شش بالش حجم 100 میلی لیتر منتقل کنید، که با مرحله متحرک به علامت رقیق می شوند.و به خوبی مخلوط کنید تا یک سری استاندارد از منحنی های کاری را با غلظت 0 آماده کنید..8ng/mL، 1ng/mL، 2ng/mL، 3ng/mL، 4ng/mL و 6ng/mL

2.1.5 راه حل استاندارد مرجع: مقدار مناسبی از استاندارد مرجع N-Nitroso-propranolol را با دقت وزن کنید.محلول را با فاز متحرک حل و رقیق کنید تا محلول حاوی تقریبا 2ng N-Nitroso-propranolol در هر 1ml به عنوان محلول استاندارد مرجع تهیه شود..

2.2 آماده سازی نمونه

2.2.1 نمونه محلول: مقدار مناسبی از قرص های هیدروکلورید پروپرانولول را به طور دقیق وزن کنید، آن را حل کنید و با مرحله متحرک رقیق کنید تا محلول حاوی تقریبا 0.27 میلی گرم پروپرانولول در هر 1 میلی لیتر به عنوان محلول نمونه

2.2.2 دقت محلول: تقریباً 297mg از قرص های هیدروکلوراید پروپرانولول پودر باریک را به دقت در یک بطری 100 میلی لیتر وزن کنید.مقدار مناسب محلول استاندارد مرجع N-Nitroso-propranolol را اضافه کنید، حل و رقیق کردن تا علامت با فاز متحرک برای آماده کردن یک نمونه 100٪ است. به خوبی مخلوط برای به دست آوردن محلول دقت.

3. نتیجه آزمایش

3.1 خاصیت

شکل 2 کروماتوم خاصیت

توجه: حلال در تشخیص N-Nitroso-propranolol دخالت نمی کند.و قله های کروماتوگرافی دیگر ناخالصی ها در محلول آزمایش نیز در تعیین ناخالصی N-Nitroso-propranolol دخالت نمی کنند..

3.2 آزمایش خطی

شکل 3 منحنی استاندارد ناخالصیت N-Nitroso-propranolol

توجه: نتایج آزمایش نشان می دهد که ضریب همبستگی (R) منحنی آزمایش ناخالصی N-Nitroso-propranolol بیش از 0 است.999، مطابق با الزامات آزمایش.

3.3 آزمایش تکرار

شکل 4 کروماتوگرافی شش تزریق تکرار شده برای استاندارد 2ng/mL

جدول 3 داده های شش تزریق تکرار شده برای استاندارد 2ng/mL

توجه: همانطور که در جدول بالا نشان داده شده است، تکرار پذیری زمان نگهداری N-nitroso-propranolol 0.043% و تکرار پذیری منطقه اوج 0.464% است که نشان دهنده تکرار پذیری خوب است.

3.4 آزمایش دقت

شکل 5 کروماتوگرام های دقیق N-Nitroso-propranolol در قرص ها

جدول ۴ دقت قرص های پروپرانولول هیدروکلوراید (N-Nitroso-propranolol)

توجه: بازیافت N-Nitroso-propranolol در شش نمونه از 96.98٪ تا 104.71٪ با بازیافت متوسط 101.38٪ بود. این روش دقت و تکرار خوبی را نشان می دهد.

3.5 آزمایش LOD

شکل 6 کروماتوگرافی آزمایش N-Nitroso-propranolol در غلظت استاندارد 2ng/ml

جدول 5 داده های آزمایش مرجع N-Nitroso-propranolol در غلظت استاندارد 2ng/ml

توجه: بر اساس داده های آزمایش برای استاندارد مرجع N-nitroso-propranolol در غلظت 2ng/ml در جدول بالا،حد تشخیص نظری N-nitroso-propranolol به 0 محاسبه می شود..151ng/mL با استفاده از نسبت سیگنال به سر و صدا 3: 1 به عنوان معیار محدودی تشخیص.

3.6 آزمایش یک برچسب قرص

شکل 7 کروماتوم آزمایشی قرص های برند

توجه: N-Nitroso-propranolol در قرص های برند شناسایی نشده است.

4نتیجه گیری

A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)با توجه به حداکثر دوز روزانه این محصول (200mg) ، حد کنترل در قرص ها نباید بیش از 7mg باشد..اعتبارپذیری روش با استفاده از سری کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC) Wayeal® که مجهز به آشکارساز UV است انجام شد.نمونه های قرص با استفاده از روش تشخیصی معتبر تجزیه و تحلیل شدند.تمام داده های فوق مطابق با الزامات داروسازی برای ابزار است.