تعیین محتوای فوکسیم در برنج با سیستم کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی دوگانه LCMS-TQ9200 ویال

فوکسیم، با فرمول شیمیایی C₁₂H₁₅N₂اوه₃PS، یک حشره کش ارگانوفوسفوری مصنوعی است. این اثر حشره کش خود را با مهار فعالیت کولینستراز در آفات به دست می آورد و عملکرد طبیعی سیستم عصبی آنها را مختل می کند.و مانع از فعالیت های فیزیولوژیکی منظم آنها می شود.در مقایسه با سایر حشرات کش ها مانند پیریتروئیدها و کاربامات ها، فوکسیم با طیف گسترده ای از حشرات کش، اثربخشی کنترل برجسته در برابر لارواهای لپیدوپتر،قیمت گذاری معتدلدر کاربرد عملی، فوکسیم مستعد استفاده بیش از حد یا استفاده بیش از محدوده توصیه شده است.که منجر به مشکل گسترده باقی مانده های آفت کش در محصولات کشاورزی می شود.باقیمانده های آفت کش می توانند به اثرات منفی متعددی منجر شوند. از یک طرف، آنها از طریق زنجیره غذایی در بدن انسان جمع می شوند و به طور بالقوه باعث مسمومیت حاد، آسیب مزمنو سایر واکنش های فیزیولوژیکی غیر طبیعیاز سوی دیگر، آنها می توانند از طریق تخلیه زمین های کشاورزی وارد محیط زیست شوند.افزایش غلظت اجزای آفت کش در محیط زیست و در نتیجه تأثیر غیرمستقیم هم بر محیط زیست و هم بر سلامت انسانبه طور خاص، فوکسیم خطرات بالقوه ای را برای جمعیت های حساس مانند کودکان و زنان باردار ایجاد می کند.اگر این افراد مقادیر بیش از حد فوکسیف را مصرف کنند یا مقادیر بالایی از آن را در بدن خود جمع کنند، ممکن است منجر به اختلال عملکرد اندام و اثرات مضر بر سلامتی شود.تشخیص بقایای آفت کش فوکسیم در محصولات کشاورزی به یک عنصر اساسی و حیاتی کنترل ایمنی مواد غذایی تبدیل شده است..

این آزمایش مطابق با استاندارد ملی GB/T 20770-2008 انجام شد."تعین 486 آفت کش و باقیمانده های شیمیایی مرتبط در دانه ها با کروماتوگرافی مایع - طیف سنجی تاندمیتجزیه و تحلیل محتوای فوکسیم در برنج با استفاده از Wayeal LCMS-TQ9200 سیستم کروماتوگرافی مایع - طیف سنجی تاندمی انجام شد.این پروتکل مجهز به سیستم کروماتوگرافی مایع-تندم طیف سنجی جرم Wayeal است، که الزامات تشخیص روتینی کیفی و کمی نمونه های آزمایش را برآورده می کند.

کلمات کلیدی: اسپکترومتر جرم سه قطب چهار قطب، فوکسیم، بقایای آفت کش

1ابزار و عوامل

1.1 فهرست پیکربندی ابزار

جدول 1 فهرست پیکربندی ابزار

1.2 واکنش ها و استانداردها

جدول ۲: واکنش ها و استانداردها

1.3 مواد آزمایشی و تجهیزات کمکی

مخلوط کننده گرد و غبار؛

سانتریفیوژ با سرعت بالا؛

تعادل تحليلي

2روش تجربی

2.1 آماده سازی محلول

2.1.1 اسید استونیتریل استیک (99+1، v/v): 10 میلی لیتر اسید استونیتریک را اندازه گیری کنید و آن را به 990 میلی لیتر استونیتریل اضافه کنید، سپس به خوبی مخلوط کنید.

2.1.2 آمونیم فورمات- محلول آبی اسید فورمیک (۲ میلی مول/لیتر): 0.1261 گرم آمونیم فورمات را وزن کنید، آن را در آن حل کنید و به 1000 میلی لیتر با 0.01٪ محلول آبی اسید فورمیک رقیق کنید.سپس به خوبی تکان دهید تا یکسان شود..

2.1.3 آمونیوم فورمات- اسید فورمیک در محلول متانول (2 میلیمتر/ لیتر): 0.1261 گرم آمونیوم فورمات را وزن کنید، آن را در آن حل کنید و به 1000 میلی لیتر با 0.01٪ اسید فورمیک در محلول متانول رقیق کنید.سپس به خوبی تکان دهید تا یکسان شود..

2.2 پیش پردازش نمونه

5g از نمونه آزمایش را وزن کنید (با دقت±0.01g) به یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر. 10 میلی لیتر آب اضافه کنید، گرد و غبار را به طور کامل مخلوط کنید و برای 30 دقیقه باقی بگذارید. 15 میلی لیتر محلول اسیتونیتریل اسید اکتیک و یک همجوشی کننده سرامیکی اضافه کنید.سپس به شدت برای 1 دقیقه تکان دهید.سپس، 6g سولفات منیزیم بدون آب و 1.5g از استات سدیم را اضافه کنید، به شدت برای یک دقیقه دیگر تکان دهید و سپس در 4200 r/min برای 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید.به طور کمی، سوپرناتانت را به یک لوله سانتریفیوژ پلاستیکی که حاوی یک عامل تخلیه و مواد تصفیه کننده است (با استفاده از 150mg سولفات منیزیم بدون آب) منتقل کنید.، 50 میلی گرم C18 و 50 میلی گرم PSA در هر میلی لیتر عصاره). سانتریفیوژ در 4200 r/min برای 5 دقیقه، سپس از بالا کشیدن و آن را از طریق یک فیلتر غشا میکروپوروس برای تعیین بعدی.

2.3 شرایط آزمایش

2.3.1 شرایط کروماتوگرافی مایع

ستون های کروماتوگرافی: C18 1.7μm 2.1x50 میلی متر"

فاز متحرک: فاز A: اسید فورمات آمونیوم فورمیک در محلول متانول (2mmol/L) ، فاز B: محلول آبی اسید فورمات آمونیوم فورمیک (2mmol/L).

سرعت جریان: 0.3mL/min

دمای ستون: 40°ج.

حجم تزریق: 5μL.

2.3.2 شرایط طیف سنجی جرم

جدول 3 پارامترهای طیف سنجی جرم ترکیبات

توجه: یون نشان داده شده با * یون کمی است.

3نتیجه آزمایش

3.1 استاندارد کروماتوگرام

تعیین فوکسیم در عرض 6.5 دقیقه تکمیل شد. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده، پیک ترکیبی شکل پیک خوب و پاسخ رضایت بخش را نشان می دهد.که الزامات تجزیه و تحلیل تجربی را برآورده می کند.

شکل 1 کروماتوگرافی Phoxim

3.2 محدوده خطی

مقادیر مناسب محلول استاندارد فوکسیم گرفته شده و به صورت سریال با ماتریس خالی رقیق می شود تا غلظت ۱۰، ۵، ۲، ۱، ۰ بدست آید.5، 0.1، و 0.05ng/mL برای آماده سازی منحنی کالیبراسیون. محدوده خطی از 0.05 تا 10ng/mL تعیین شد.انحراف نتایج تشخیص خطی از غلظت های شناخته شده در محدوده حداکثر انحراف مجاز بود.ضریب همبستگی (R²) 0 بود.99971، نشان دهنده یک رابطه خطی عالی برای تحلیلگر است.

شکل 2 منحنی استاندارد فوکسیم

3.3 تکرار

محلول های فوکسیم در سه غلظت (0.5نتایج، همانطور که در جدول زیر نشان داده شده است، نشان می دهد که انحرافات استاندارد نسبی (RSD) برای تمام نقاط داده در بالا، متوسط،و غلظت های پایین فوکسیم در حدود 5 درصد است.، که با الزامات تجربی مطابقت دارد.

جدول ۴ آزمایش تکرار پذیری فوکسیم در غلظت های بالا، متوسط و پایین

3.4 بازیافت اوج

محلول استاندارد فوکسیم به نمونه اضافه شد تا غلظت 4ng / ml به دست آید و سپس نمونه با LC-MS تجزیه و تحلیل شد. نتایج در شکل 3 نشان داده شده است.میانگین مقدار از شش تزریق متوالی 4.194ng/mL، با RSD 4.623٪ و نرخ بازیابی 104.85٪، که نیازهای تجربی را برآورده می کند.

شکل 3 کروماتوگرافی از بازیابی Phoxim Spike

3.5 بقایای خالی

پس از تزریق مداوم محلول استاندارد 10ng/mL، یک نمونه ماتریس خالی برای ارزیابی و محاسبه بقایای خالی تزریق شد.نشان می دهد که هیچ باقیمانده ای خالی تشخیص داده نشده است..

شکل 4 کروماتوگرافی خالی

3.6 آزمایش نمونه

نمونه A با توجه به روش پیش تربیتی که در این پروتکل توصیف شده است پردازش شد و محتوای اندازه گیری شده فوکسیم در نمونه A 9 بود.552μg/kg

شکل 5 کروماتوگرافی فوکسیم در نمونه A

4نتیجه گیری

این روش از سیستم طیف سنجی تاندمی کروماتوگرافی مایع Wayeal LCMS-TQ9200 برای تعیین بقایای فوکسیم در غذاهای گیاهی استفاده می کند.

داده ها نشان می دهد که این روش باعث می شود که قله های خوبی برای طیف سنجی توده و بدون ریز تولید شود. حساسیت با الزامات تجربی مطابقت دارد، با R²بزرگتر از صفر999تکرار در غلظت های بالا، متوسط و پایین در حدود 5٪ است و نرخ بازیابی پیک 104.85٪ است.این نتایج تایید می کند که این روش، مجهز به سیستم طیف سنجی تاندمی- کروماتوگرافی مایع Wayeal، الزامات تجزیه و تحلیل کیفی و کمی معمول آنالیت های هدف را در نمونه های آزمایش برآورده می کند.