تعیین اجزای قند در محصولات روغن زراعی با کروماتوگرافی یون

این مطالعه از کروماتوگرافی یون استفاده می کند تا محتوای فروکتوز، گلوکز، ساکروز، استاکیوز و رافینوز در محصولات روغن دار را تعیین کند.نویسنده از یک کروماتوگراف یون وایال مجهز به یک آشکارساز آمپرومتریک استفاده کرده است، با استفاده از یک NaOH خود آماده شده و محلول آب به عنوان محلول. این روش دارای پیش پردازش ساده، بازیابی عالی و حساسیت بالا است، که آن را برای تعیین فروکتوز مناسب می کند,محتوای گلوکز، ساکاروز، استاکایوز و رافینوز در دانه های روغن دار همانطور که در استاندارد مشخص شده است.

کلمات کلیدی: دانه های روغن دار، کروماتوگرافی یون، قند

1ابزارها و عوامل

1.1 فهرست پیکربندی کروماتوگرافی یون

جدول 1 فهرست پیکربندی ابزار

1.2 واکنش ها و راه حل های استاندارد

جدول 2 جدول عوامل و استانداردها

1.3 مواد آزمایشی و تجهیزات کمکی

تنظیم فیلتر

پاک کننده فوق صوتی

توازن تحلیلی (دقیقی 0.0001g)

شیرینی یکبار مصرف (2 میلی لیتر)

فیلتر سرنگ آب (0.22μm)

آب فوق خالص، با مقاومت 18.2 MΩ · cm (25 ° C)

2روش تجربی

2.1 آماده سازی محلول

2.1.1 محلول اسیتات روی (1mol/L): 21.9g از اسیتات روی را وزن کنید، 3mL اسید اسیدیک یخچال را اضافه کنید، آن را حل کنید و به 100mL با آب رقیق کنید.

2.1.2 محلول فروسیانید پتاسیم (1 مول/لیتر): 10.6 گرم فروسیانید پتاسیم را وزن کنید، آن را حل کنید و به 100 میلی لیتر آب رقیق کنید.

2.1.3 محلول هیدروکسید سدیم (200mmol/L): اندازه گیری 10.5mL از محلول هیدروکسید سدیم 50٪، رقیق کردن به 1000mL با آب پیش از گاز و محافظت با گاز نیتروژن.

2.2 پیش پردازش نمونه

2.2.1 برداشت نمونه

5g از نمونه را وزن کنید (با دقت 0.1mg) ، آن را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر با stopper قرار دهید، 25mL از اتر نفت را اضافه کنید، برای 1 دقیقه گرد و غبار، سانتریفیوژ در 2000r/min برای 5 دقیقه،و لایه ی بالای اتر نفتی را دور می اندازیم.مراحل فوق را دو بار تکرار کنید. باقی مانده اتر نفت را در یک حمام آب 60 درجه سانتیگراد تبخیر دهید. نمونه را با استفاده از یک میله شیشه ای به یک بطری مخروطی 150 میلی لیتر (که قبلاً به وزن ثابت رسیده است) منتقل کنید.لوله سانتریفیوژ را دو بار با 50 میلی لیتر آب بشویید.سپس به آرامی 5 میلی لیتر محلول اسیتات روی و 5 میلی لیتر محلول فروسیانید پتاسیم را اضافه کنید.آب را اضافه کنید تا جرم کل محلول حدود 100g باشد (با دقت 1mg). پس از مخلوط کردن در دمای اتاق به مدت 30 دقیقه، محلول را از طریق کاغذ فیلتر سریع کیفی فیلتر کنید. سپس فیلتر را از طریق فیلتر سرنج 0.22μm فیلتر کنید تا نمونه آزمایش را بدست آورید.همزمان، یک آزمایش خالی انجام دهید.

2.3 شرایط آزمایش

2.3.1 شرایط کروماتوگرافی

فاز متحرک: A: 200mM NaOH؛ B: آب؛ C: 20mM NaOH

سرعت جریان: 0.4 میلی لیتر/ دقیقه

زمان کار: 65 دقیقه

دمای ستون: 30°C

دمای منطقه تشخیص: 30°C

دتکتور: الکترود طلا، قندها، چهار برابر پتانسیل

حجم تزریق: 10μl

جدول 3 الوشن گرادیان

3. نتیجه آزمایش

3.1 کروماتوگرام استاندارد

جدايي پنج قند در عرض 20 دقيقه به اتمام رسيد و تمام قله ها شکل خوبي داشتند و هيچ پدیده اي وجود نداشت و تمام ترکیبات پاسخي عالي داشتند.که الزامات تعیین تجربی را برآورده می کند.

شکل 1 کروماتوم 5 قند (0.5mg/L)

جدول 4 نتایج مناسب بودن سیستم

3.2 محدوده خطی

مقدار مناسبی از محلول استاندارد مخلوط گرفته شود و برای آماده سازی یک سری غلظت برای ساخت منحنی استاندارد، تخلیه سری انجام شود. محدوده خطی 0.05 ≈ 20mg / L است.انحراف بین نتایج تشخیص خطی و غلظت های شناخته شده کمتر از حداکثر انحراف مجاز استمقادیر R2 بین 0.99985 تا 1 می باشد.00000، نشان دهنده خطی بودن عالی برای تمام اجزای آن است.

جدول 5 جدول محدوده خطی برای هر ترکیب

شکل 2 نتایج خطی برای پنج قند

3.3 دقت

محلول نمونه سویا مطابق بخش 2 استخراج شد.2.1 و تحت شرایط ابزار مشخص شده در بخش 2 مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرد.3.1 با شش تزریق متوالی. نتایج در جدول زیر نشان داده شده است. انحرافات استاندارد نسبی (RSDs) پنج قند در نمونه سویا همه در حدود 1٪ بودند.تشخیص نمونه قابل اعتماد است، و روش دقت خوبی را نشان می دهد.

جدول 3 نتایج دقیق نمونه های سویا

شکل 3 کروماتوگرافی پوشیده از چهار قند دقت در سویا

3.4 نتیجه آزمایش نمونه

3.4.1 تشخیص رطوبت

نمونه های فول سویا و سرم را که مورد آزمایش قرار می گیرند بردارید و میزان رطوبت را بر اساس GB/T 14489 تعیین کنید.1نتایج در جدول زیر نشان داده شده است.

جدول 4 نتایج رطوبت نمونه

3.4.2 آزمایش نمونه

نمونه های سویا و کنجد را که مورد آزمایش قرار می گیرند بردارید و محلول نمونه را مطابق بخش 2 استخراج کنید.2.1، و انجام تجزیه و تحلیل تزریق در شرایط ابزار مشخص شده در بخش 2.3.1نتایج آزمایش نمونه در جدول زیر نشان داده شده است. تشخیص نمونه های سویا و کنجد قابل اعتماد است و نتایج رضایت بخش است.

جدول 5 نتیجه آزمایش نمونه

شکل 4 کروماتوم آزمایشی نمونه سویا که 200 برابر رقیق شده است

شکل 5 کروماتوم آزمایشی نمونه سسامی 100 برابر رقیق شده

4نتیجه گیری

این روش از یک سیستم کروماتوگرافی یون وایال سری IC6300 مجهز به یک کشنده آمپرومتری استفاده می کند تا یک روش کروماتوگرافی یون برای تعیین فروکتوز، گلوکز،شکر، استاکایوز و رافینوز در دانه های روغن دار. نمونه ها از طریق پیش تربیتی پردازش شدند، از طریق یک ستون کروماتوگرافی یون جدا شدند و با استفاده از روش استاندارد خارجی کمی شده اند.امکان تجزیه و تحلیل کیفی و کمی فروکتوز، گلوکز، ساکاروز، استاکایوز و رافینوز در دانه های روغن دار. داده ها نشان می دهد که تمام قله های کروماتوگرافیک شکل بسیار خوبی را بدون دم نشان می دهند.حساسیت با الزامات استاندارد ملی مطابقت دارد، و ضریب های همبستگی خطی همگی بیشتر از 0 هستند.999این نشان می دهد که این روش، همراه با سیستم کروماتوگرافی یون Wanyeal، الزامات تشخیص کیفی و کمی معمول را برای نمونه های هدف برآورده می کند.