روش تحلیلی که در این مقاله معرفی شده است، با اشاره به نسخه 2020 داروسازی جمهوری خلق چین در روش آزمایش Acyclovir،با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا Wayeal سری LC3200 با یک آشکارساز DAD.
1ساختار ابزار و روش آزمایش
2.1 پیکربندی ابزار
| نه |
نام |
مقدار |
| 1 |
P3210Q پمپ چهارگانه |
1 |
| 2 |
CT3400 کوره ستون |
1 |
| 3 |
AS3210 نمونه گیری خودکار |
1 |
| 4 |
دتکتور DAD3260 |
1 |
| 5 |
Nova Atom PC18 4.6x250mm 5μm |
1 |
| 6 |
ایستگاه کاری کروماتوگرافی |
1 |
2.2 روش آزمایش
2.2.1 آماده سازی واکنشگرها
جدول ۲: لیست واکنش ها
| نه |
ماده های واکنش دهنده |
خلوص |
|
1
2
3
4
5
|
متانول
اسید فسفوریک
هیدروکسید سدیم
آسیکلوویر
گوانین
|
خلوص کروماتوگرافی ((LC)
GR
MOS
۹۸%
99 درصد
|
2.2.1.1 محلول آزمایش: 40 میلی گرم نمونه را به یک کولب اندازه گیری 200 میلی لیتر بردارید، 2 میلی لیتر هیدروکسید سدیم 0.4٪ را برای حل آن اضافه کنید، سپس 25 میلی لیتر 0.محلول 1٪ (V/V) اسید فسفوریک و آن را با آب تا مقیاس رقیق کنید، خوب تکون بده
2.2.1.2 محلول مرجع: 1 میلی لیتر محلول آزمایش را به یک کولت اندازه گیری 100 میلی لیتر بردارید، 5 میلی لیتر محلول 0.1٪ اسید فسفوریک را اضافه کنید، با آب به اندازه رقیق کنید و به خوبی تکان دهید.
2.2.1.3 محلول ذخیره سازی کنترل گوانین: 10 میلی گرم گوانین مرجع را به یک کولب اندازه گیری 50 میلی لیتر بردارید، 5 میلی لیتر محلول 0.4٪ هیدروکسید سدیم را برای حل آن اضافه کنید، سپس 5 میلی لیتر 0.محلول ۱٪ اسید فسفوریک، آن را با آب به مقیاس رقیق کنید، به خوبی تکان دهید.
2.2.1.4 محلول مرجع گوانین: 1 میلی لیتر محلول ذخیره سازی مرجع گوانین را به یک بطری 100 میلی لیتری وارد کنید، با آب رقیق کنید و به خوبی تکان دهید.
2.2.1.5 مناسب بودن سیستم محلول: مقدار مناسب هر یک از محلول های مرجع و محلول های مرجع گوانین را بردارید، در حجم برابر مخلوط کنید و به خوبی تکان دهید.
2.2.2 وضعیت کروماتوگرافی
جدول 3 شرایط کروماتوگرافی
| ستون کروماتوگرافی |
ستون کروماتوگرافی Nova Atom PC18، 4.6*250mm، 5μm |
| فاز متحرک |
مرحله A: آب |
مرحله B: متانول |
| نرخ جریان |
1 میلی لیتر/دقیقه |
| دمای ستون |
۳۵ درجه سانتیگراد |
طول موج |
254nm |
| حجم تزریق |
20μL |
جدول 4 نسبت فاز متحرک
| زمان (دقیقه) |
مرحله A |
مرحله B |
| 0 |
94 |
6 |
| 15 |
94 |
6 |
| 40 |
65 |
35 |
| 41 |
94 |
6 |
| 51 |
94 |
6 |
3. نتیجه آزمایش
3.1 راه حل سازگاری سیستم
شکل 1 کروماتگرام آزمایش مناسب سیستم
جدول 5 راه حل مناسب بودن سیستم داده های تست
| نه |
مرکب |
زمان نگهداری |
منطقه قله |
شماره تیوریک صفحه |
جدایی |
| 1 |
گوانین |
5.698 |
138.675 |
17173 |
12.334 |
| 2 |
آسیکلوویر |
8.425 |
139.902 |
15786 |
n.a. |
توجه: از نمودار بالا و داده های موجود در جدول می توان دید که آسیکلوویر و گوانین دارای شکل های پیک بهتر و تعداد صفحه نظری بالا هستند. درجه جدایی بیش از 3 است.0که مطابق با الزامات داروسازی است.
3.2 تکرار
شکل 2 کروماتوم تکرار پذیری 6 تزریق مناسب سیستم
جدول 6 داده های تکرار پذیری از 6 تزریق مناسب سیستم زمان نگهداری محلول
| نمونه |
نه |
گوانین |
آسیکلوویر |
|
زمان نگهداری
|
1 |
5.698 |
8.408 |
| 2 |
5.701 |
8.415 |
| 3 |
5.705 |
8.411 |
| 4 |
5.701 |
8.405 |
| 5 |
5.705 |
8.401 |
| 6 |
5.705 |
8.398 |
| RSD (٪) |
0.048 |
0.074 |
جدول 7 داده های تکرار پذیری از 6 تزریق مناسب سیستم محلول
| نمونه |
نه |
گوانین |
آسیکلوویر |
|
منطقه قله
|
1 |
136.997 |
138.836 |
| 2 |
138.496 |
139.117 |
| 3 |
137.783 |
139.505 |
| 4 |
136.663 |
138.204 |
| 5 |
137.755 |
137.968 |
| 6 |
137.789 |
139.374 |
| RSD (٪) |
0.475 |
0.452 |
توجه: با توجه به داده های جدول بالا، RSD زمان حفظ گوانین و acyclovir در محلول سیستم مناسب 0.048٪ و 0.074٪ و RSD منطقه اوج 0.475% و 0.452 درصدنتایج بازتولید خوب هستند و نیازهای تجربی را برآورده می کنند.
3.3 محلول آزمایش
شکل 3 کروماتوم نمونه آزمایش
جدول 8 داده های آزمایش نمونه آزمایش
| نمونه |
مرکب |
زمان نگهداری |
منطقه قله |
ارتفاع قله |
شماره تیوریک صفحه |
| نمونه آزمایش |
آسیکلوویر |
8.385 |
22385.51 |
1806.31 |
10082 |
توجه: بر اساس کروماتوگرام فوق و داده های نشان داده شده، هیچ قله دیگری در کروماتوگرام نمونه آزمایش وجود ندارد و شکل قله خوب است، تعداد پلات نظری بالا است.که الزامات محدوده داروسازی را در مورد گوانین و سایر مواد در روش آزمایش آسیکلوویر برآورده می کند.
3.4 يادداشت
هیدروکسید سدیم بسیار خوردنی است، بنابراین هنگام آماده سازی محلول ها مراقب باشید.
4نتیجه گیری
روش تحلیلی که در این مقاله معرفی شده است، با اشاره به نسخه 2020 داروسازی جمهوری خلق چین در روش آزمایش Acyclovir،با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا Wayeal سری LC3200 با یک آشکارساز DADنتایج تجربی نشان داد که آسیکلوویر و گوانین دارای شکل های پیک بهتر و تعداد صفحه نظری بالا هستند. درجه جدایی بالاتر از 3 است.0RSDs برای گوانین و acyclovir در راه حل های سیستم مناسب 0.048٪ و 0.074٪ و RSDs منطقه اوج 0.475 درصد و 0.452٪ به ترتیب. نتایج تکرار پذیری خوب است و نیازهای تجربی را برآورده می کند.هیچ قله دیگری در کروماتوگرام نمونه آزمایش وجود ندارد و شکل قله خوب است و تعداد پلات نظری بالا است.، که با الزامات داروسازی برای محدودیت روش آزمایش Acyclovir در مورد گوانین و سایر مواد مطابقت دارد.
پیام شما باید بین 20 تا 3000 کاراکتر باشد!
