2024-09-27
تعیین پلی اتیلن گلیکول با کروماتوگرافی نفوذ ژل
1مقدمه
هدف: تعیین وزن مولکولی و توزیع پلی اتیلن گلیکول (PEG) با استفاده از روش کروماتوگرافی نفوذ ژل با عملکرد بالا (GPC).
روش:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7.8x300 mm ستون کروماتوگرافی نفوذ ژل
دستگاه تشخیص شاخص کسر دیفرانسیل (RID)
فاز متحرک: آب بسیار خالص
سرعت جریان: 1.0ml/min
دمای ستون: 35 °C
حجم تزریق: 10μl.
منحنی های کالیبراسیون تعیین می شوند و نتایج وزن مولکولی و توزیع هر نمونه با استفاده از نرم افزار GPC محاسبه می شوند.
نتیجه: خطی بودن PEG زمانی که وزن مولکولی در محدوده 400-20000 بود خوب است. بازتولید آزمایش با 6 تزریق متوالی PEG6000 خوب است.مقدار RSD زمان نگهداری 0 است..105٪ و مقدار RSD از منطقه اوج 0.335٪ است.
نتیجه گیری: کروماتوگرافی نفوذ ژل با عملکرد بالا (GPC) یک روش قابل اعتماد برای تعیین وزن مولکولی و توزیع PEG است.که مزایای دقیق و بازتولید پذیری بالا را در هنگام استفاده از آن برای ارزیابی خاصیت پلی دیسپرسیت ترکیبات پلیمر دارد.
کلمات کلیدی: HPLC، GPC، RID، پلیمر، پلی اتیلن گلیکول
2روش تجربی
2.1 پیکربندی ابزار
جدول 1 فهرست پیکربندی کروماتوگراف مایع با کارایی بالا
| نه | مدولار | مقدار |
| 1 | کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا سری LC3200 | 1 |
| 2 | پمپ دوگانه PB3200 | 1 |
| 3 | RID3300 | 1 |
| 4 | CT3200 کوره ستون | 1 |
| 5 | AS3200 نمونه گیری اتوماتیک | 1 |
2.2 شرایط آزمایش
ستون کروماتوگرافی: Xtimate SEC-120,5μm،7.8x300mm
دمای ستون: 35°C
شناسه: RID
میزان جریان: 1.0 میلی لیتر/ دقیقه
فاز متحرک: آب
حجم تزریق: 10μL
2.3 ابزار/جوهر و مواد مصرفی
عامل های:
آب فوق خالص
استاندارد: PEG400؛ PEG2000؛ PEG6000؛ PEG10000؛ PEG20000
تجهیزات کمکی
ترازو های تحلیلی
واحد استخراج حلال
پاک کننده فوق صوتي
مواد تجربی
غشای فیلتر: غشای فیلتر آب 0.45μm
2.4 آماده سازی استاندارد PEG
هر یک از پیپیت های PEG400، PEG2000، PEG6000, PEG10000 و PEG20000 با مقدار 0.20g، 10 میلی لیتر آب را برای حل اضافه کنید، به خوبی مخلوط کنید و غلظت 20mg/ml نمونه را برای آزمایش آماده کنید.
3نتایج و بحث
3.1 استانداردهای مختلف وزن مولکولی
شکل 1 کروماتگرام PEG400
جدول ۱ پارامترهای کروماتوگرافیک PEG400
| نه | ترکیبات | زمان نگهداری | منطقه قله | شماره تابلوی تریاکال | عامل عقب مانده |
| 1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
جدول ۲ پارامترهای کروماتوگرافیک PEG2000
| نه | ترکیبات | زمان نگهداری | منطقه قله | شماره تیوریک صفحه | عامل عقب مانده |
| 1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
شکل 3 کروماتگرام PEG6000
جدول ۳ پارامترهای کروماتوگرافیک PEG6000
| نه | ترکیبات | زمان نگهداری | منطقه قله | شماره تیوریک صفحه | عامل عقب مانده |
| 1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
شکل 4 کروماتوگرافی PEG10000
جدول ۴ پارامترهای کروماتوگرافیک PEG10000
| نه | ترکیبات | زمان نگهداری | منطقه قله | شماره تیوریک صفحه | عامل عقب مانده |
| 1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
شکل 5 کروماتوگرام PEG20000
جدول ۵ پارامترهای کروماتوگرافیک PEG20000
| نه | ترکیبات | زمان نگهداری | منطقه قله | شماره تیوریک صفحه | عامل عقب مانده |
| 1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
شکل 6 کروماتوگرافی های همپوشانی با وزن مولکولی متفاوت
توجه: داده های بالا نشان می دهد که زمان نگهداری PEG20000 6.081 دقیقه و PEG400 10.315 دقیقه است، مولکول های بزرگتر ابتدا و مولکول های کوچکتر بعداً حذف می شوند.
3.2 تکرار
شکل 7 کروماتوگرام های همپوشانی تکرار پذیری PEG6000 (n=6)
جدول 7 پارامترهای کروماتوگرافی تکرار پذیری PEG6000 (n=6)
| نه | نمونه ها | زمان نگهداری | منطقه قله |
| 1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
| 2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
| 3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
| 4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
| 5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
| 6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
| متوسط | - | 7.225 | 500.416 |
| RSD ((%) | - | 0.105 | 0.335 |
توجه داشته باشید: تکرار پذیری خوب است. RSD زمان حفظ 0.105٪ و RSD منطقه اوج 0.335٪ برای 6 تزریق PEG6000 است.
3.3 منحنی های استاندارد
شکل 8 منحنی های استاندارد کروماتگرام های دارای وزن مولکولی مختلف
جدول 8 منحنی های استاندارد پارامترهای کروماتوگرافی وزن مولکولی مختلف
توجه: وزن مولکولی و نتایج توزیع هر نمونه با استفاده از نرم افزار GPC محاسبه می شود. خطی بودن وزن مولکولی PEG در محدوده 400 تا 20 خوب است.000، و ضریب همبستگی خطی 0 است.999.
4نتیجه گیری
این آزمایش پلی اتیلن گلیکول (PEG) با استفاده از کروماتوگرافی ژل با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا سری LC3200 با آشکارساز شاخص کسر دیفرانسیل انجام می شود.زمان نگهداری PEG20000 6 است.081 دقیقه و PEG400 10.315 دقیقه است، مولکول های بزرگتر ابتدا و مولکول های کوچکتر بعداً حذف می شوند. تکرار پذیری خوب است. RSD زمان نگهداری 0.105% و RSD از منطقه اوج 0 است.335درصد براي 6 تزريق PEG6000 خطي بودن وزن مولکولي PEG در محدوده 400 تا 20 خوب است000، و ضریب همبستگی خطی 0 است.9999کروماتوگرافی نفوذ ژل با عملکرد بالا (GPC) یک روش قابل اعتماد برای تعیین وزن مولکولی و توزیع PEG است.که مزایای نتایج دقیق و قابل تکرار را در هنگام استفاده از آن برای ارزیابی خاصیت پلی دیسپرسیت ترکیبات پلیمر دارد.
توجه: نمونه باید بیش از 12 ساعت در دمای اتاق باقی بماند و باید به آرامی مخلوط شود، با استفاده از سونوگرافی یا تکان دادن شدید برای تسریع محلول.
درخواست خود را به طور مستقیم به ما بفرستید
