2024-09-05
تعیین الکل قند در مواد غذایی با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا
1روش و اصل
با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا با یک آشکارساز RID تعیین شده و با روش استاندارد خارجی کمی شود.
2ساختار ابزار و روش های تجربی
2.1 پیکربندی ابزار
نه، نه | تنظیمات سیستم | مقدار |
1 | P3210B پمپ دوگانه گرادیانت فشار بالا | 1 |
2 | CT3210 اجاق چوبی | 1 |
3 | AS3210 نمونه گیری خودکار | 1 |
4 | شناسه ی RI | 1 |
5 | 4.6*250mm 5μm ستون آمینو | 1 |
6 | استیشن کاری SmartLab | 1 |
جدول1 فهرست پیکربندی
2.2 روش آزمایشی
2.2.1 آماده سازی واکنش ها و استانداردها
نه، نه | ماده های واکنش دهنده | خلوص |
1 | استونیتریل | از نظر کروماتوگرافی خالص |
2 | 4 نوع از استاندارد های ترکیب شیرین کننده | ۴۰ گرم در لیتر |
جدول ۲: فهرست عوامل و استانداردها
منحنی استاندارد: استاندارد مخلوط (40 mg/mL) از چهار شیرین کننده با آب به غلظت 1.6 mg/mL، 2.4 mg/mL، 3.2 mg/mL، 4.0 mg/mL، 4.8 mg/mL رقیق شد.0 mg/mL سری از منحنی های کار غلظت.
2.22 شرایط کروماتوگرافی
ستون کروماتوگرافی | ستون آمینو، 4.6*250mm، 5μm | ||
فاز متحرک | استونیتریل: آب=80:20 | ||
نرخ جریان | 1 میلی لیتر/دقیقه | ||
درجه حرارت | 30°C | دمای سلول | ۴۰ درجه سانتیگراد |
حجم تزریق | 20μL |
جدول 3 شرایط کروماتوگرافی
2.2.3 پیش پردازش نمونه
نمونه های نوشیدنی های غیر پروتئین نباید کمتر از 200 میلی لیتر باشند و پس از مخلوط شدن کاملاً در یک ظروف ضد هوا قرار داده شوند.و حجم را به 50 میلی لیتر با آب ثابت کنید.، به خوبی تکان داده شود و بعد از عبور از غشای فیلتر 0.22μm در یک دستگاه تشخیص داده شود.
3نتایج تجربی
3.1 مناسب بودن سیستم
شکل 1 کروماتوگرام استاندارد مخلوط کننده شیرین کننده 6.0mg/mL
يادداشت:همانطور که در شکل نشان داده شده است، قله های شکل خوبی از اریتریتول، ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول وجود دارد و قله های دیگری در اطراف قله های هدف وجود ندارد که نیازهای تجربی را برآورده کند.
3.2 خطی بودن
شکل 2 منحنی استاندارد اریتریتول
شکل 3 منحنی استاندارد ژایلیتول
شکل 4 منحنی استاندارد سوربیتول
شکل 5 منحنی استاندارد مالتوز
غلظت منحنی های استاندارد مخلوط چهار شیرین کننده 1.6 mg/mL، 2.4 mg/mL، 3.2 mg/mL، 4.0 mg/mL، 4.8 mg/mL و 6.0 mg/mL است.ضریب همبستگی خطی منحنی های استاندارد چهار شیرین کننده بالاتر از 0 است.999، که نیازهای تجربی را برآورده می کند.
3.3 تکرار
شکل ۶ کروماتوم تکرار پذیری ۶ تزریق ۳.۲mg/ml استاندارد مخلوط شیرین کننده
زمان نگهداری |
نه، نه |
اریتریتول |
ژایلیتول |
سوربیتول |
مالتیتول |
1 |
8.407 |
11.365 |
15.637 |
36.644 |
|
2 |
8.414 |
11.374 |
15.638 |
36.658 |
|
3 |
8.415 |
11.377 |
15.644 |
36.645 |
|
4 |
8.412 |
11.374 |
15.638 |
36.635 |
|
5 |
8.426 |
11.391 |
15.670 |
36.696 |
|
6 |
8.436 |
11.405 |
15.680 |
36.701 |
|
RSD ((%) |
0.128 |
0.128 |
0.120 |
0.077 |
جدول 4 6 تزریق تکرار زمان نگهداری
منطقه قله |
نه، نه | اریتریتول | ژایلیتول | سوربیتول | مالتیتول |
1 | 228.976 | 239.243 | 234.601 | 224.837 | |
2 | 230.029 | 238.083 | 239.130 | 224.900 | |
3 | 224.656 | 237.784 | 236.914 | 222.373 | |
4 | 227.415 | 239.595 | 238.192 | 222.414 | |
5 | 227.455 | 240.591 | 238.963 | 223.679 | |
6 | 228.492 | 239.876 | 237.412 | 227.865 | |
RSD ((%) | 0.809 | 0.450 | 0.705 | 0.913 |
جدول 5 6 تزریق تکرار پذیری منطقه اوج
توجه: همانطور که در جدول نشان داده شده است، زمان حفظ RSD از اریتریتول، ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول 0.128٪، 0.128٪، 0.120٪، 0.077٪ و تکرار زمان حفظ کمتر از 0.2٪ بود،که الزامات تجربی را برآورده می کندRSD های منطقه اوج erythritol، xylitol، sorbitol و maltitol 0.809٪، 0.450٪، 0.705٪ و 0.913٪ هستند.که الزامات تجربی را برآورده می کند.
3.4 حد تشخیص
شکل 7 کروماتوگرافی از استاندارد مخلوط شیرین کننده 1.6mg/mL
توجه: همانطور که در شکل 7 نشان داده شده است، غلظت مخلوط شیرین کننده 1.6 mg/mL استاندارد، SNR سه گانه از محدوده ی تشخیص اریتریتول، ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول 0 محاسبه می شود.01 میلی گرم/میل، 0.012 mg/mL، 0.015 mg/mL و 0.03 mg/mL که نیازهای تجربی را برآورده می کنند.
3.5 یک نوشیدنی غیر پروتئینی با نام تجاری
شکل 8 کروماتوگرافی یک نوشیدنی با نام تجاری در دو تزریق
نمونه ها | منطقه قله |
نمونه 1 | 209.594 |
نمونه 2 | 209.001 |
ارزش متوسط ریاضی | 209.298 |
جدول 6 2 تزریق برای نوشیدنی های برند دار
همانطور که در کروماتوگرام نشان داده شده است، اریتریتول در یک نوشیدنی برند یافت می شود و ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول شناسایی نمی شوند. نتایج آزمایش با لیست مواد تشکیل دهنده سازگار است.داده های موجود در جدول نتایج دو آزمایش با تفاوت مطلق 0 است..14 درصد از میانگین ریاضی، که کمتر از 10 درصد از نیاز استاندارد است.
3.6 توجه
از آنجا که آشکارساز شاخص کسر دیفرانسیل نسبت به تراکم محلول حساس است، توصیه می شود که مرحله متحرک در هنگام انجام آزمایش از قبل مخلوط شود.
4 نتیجه گیری
روش تحلیلی معرفی شده در این مقاله به استاندارد ملی GB 5009.279-2016 (تعیین اکسایلیتول، سوربیتول، مالتیتول و اریتریتول در مواد غذایی) اشاره دارد.با استفاده از یک کروماتوگراف مایع با عملکرد بالا از سری Wayeal LC3200 با یک آشکارساز RIDنتایج تجربی نشان داد که آزمایش سیستم سازگاری از اریتریتول، ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول، قله ها خوب هستند و قله های دیگری در اطراف قله های هدف وجود ندارد.RSDs برای زمان نگهداری 0 است..128٪، 0.128٪، 0.120٪، و 0.077٪، همه کمتر از 0.2٪. RSD های منطقه اوج 0.809٪، 0.450٪، 0.705٪، 0.913٪ و کمتر از 1٪ هستند. SNR = 3 به عنوان حد تشخیص، سپس محدودیت های تشخیص اریتریتول،ژایلیتول، سوربیتول و مالتیتول 0.01 mg/mL، 0.012 mg/mL، 0.015 mg/mL و 0.03 mg/mL هستند. تفاوت مطلق بین این دو اندازه گیری 0.14٪ از میانگین ریاضی است.که کمتر از ۱۰ درصد از نیاز استاندارد است.تمام داده های فوق نشان می دهد که نتایج نیازهای تجربی را برآورده می کند.
درخواست خود را به طور مستقیم به ما بفرستید